Fluoreszenz-basiertes Monitoring der ribosomalen Aktivität zur Optimierung der Ausbeute von rekombinanten Proteinen

In-vitro-Transkriptions-/Translations-Systeme (ivtt) werden vor allem in der Biotechnologie benötigt, um beispielsweise rekombinante Proteine zu gewinnen, deren Produktion in vivo toxisch wäre. Die experimentelle Auswertung erfolgt üblicherweise mittels Autoradiographie, erfordert also die Markierung der Translationsprodukte mit radioaktiven Isotopen, deren Handhabung teuer, potenziell gesundheitsgefährdend und Durchsatz-limitierend ist.
Die erfindungsgemäßen stabilen Bakterienstämme mit Fluoreszenz-markierten ribosomalen Untereinheiten, die Wildtyp-ähnliche Wachstumseigenschaften zeigen und einen intakten Translations-Apparat aufweisen, eröffnen die Chance durch Fluoreszenz-basierte Erfassung der Translationsaktivität in Echtzeit Experimente zeitsparend und kostenminimierend im Multiwellformat durchzuführen und zwecks Optimierung der Ausbeute mehrere Reaktionsparameter parallel variieren zu können.

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Dipl.-Biol. Marcus Lehnen, MBA

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